邹定 吴学军 何笑荣 （卫生部北京医院药剂科100730） [摘要] 目的: 考察市售左旋氧氟沙星注射液的质量。方法：采用高效液相色谱法测定含量和有关物质、右旋体检查。结果：通过实验考核4个厂家的15批次样品，结果样品间含量无显著性差异（P>0.01）。？测定范围内的相关系数分别为0.9995？；加样回收率为99.59%，RSD=1.89%；注射液有关物质检查显示不同厂家杂质峰出峰数量不同，单一杂质峰面积大小和各杂质峰面积之和也各不相同，有一个厂家两个批号样品已超标，尤其是光照杂质峰；两个厂家8个样品检出右旋体；有一个厂家渗透压已接近高限。结论：不同厂家注射液有关物质和右旋体含量有较大差异，这提示我们在生产、储存和使用过程中应特别注意避光操作，掌握不同厂家的内在质量差异，减少临床反应，加强质量控制，进一步提高注射液质量。 [关键词] 左旋氧氟沙星注射液；质量考核；高效液相色谱法 左旋氧氟沙星为常用的临床药物。由于起抗菌作用的成分主要为氧氟沙星的左旋体（即左旋氧氟沙星），其抗菌活性约为氧氟沙星的2倍，我国生产该制剂有上百个厂家，若质量低劣的左旋氧氟沙星的注射剂用于临床，会延误病程，对病人造成严重损失和痛苦，所以对左旋氧氟沙星的制剂进行质量评价是非常必要的。左旋氧氟沙星注射剂在部颁标准已有收载，但是大多数标准均没有控制右旋异构体，只进行了有关物质的限量检查。为了更有效的保证左旋氧氟沙星注射剂的质量，控制右旋异构体限量是非常必要的。 在实验中通过反复探索HPLC色谱条件（色谱条件、进样量、最大吸收波长等），成功地进行左、右旋氧氟沙星异构体的手性分离，准确地测定出样品中右旋体占左旋体主峰面积的百分比及样品中所含有关物质的限量。我们通过对以下四个不同生产厂家的左氧氟沙星注射剂15批次样品的测定结果，可以较客观地对其样品的内在质量做出以下报告。 样品来源 我院临床使用的品种，四个厂家15批号（A厂：批号为0201C02；0204C07；0112C03。B厂：批号为020120-1；020920-2；020919-2；批号为021030；021028；021031。 C厂：批号为02111312；02111413；02111321。D厂：批号为021101；021104；021105）。规格有100ml：0.3g·瓶^-1，100ml：0.1g·瓶^-1，100ml：0.2g·瓶^-1。 仪器和试药 1 仪器 Waters2695高效液相色谱仪，Waters2996二极管震裂检测器，Waters Miliennium色谱工作站。 2 试药 2.1 对照品 左氧氟沙星、氧氟沙星标准品为中国药品生物制品检定所提供。 2.2 试剂 L—苯丙氨酸、D—苯丙氨酸、L-异亮氨酸、D-异亮氨酸为中国科学院微生物研究所提 供，己烷磺酸钠为ACROS ORGANICS公司生产，甲醇、乙腈为TEDIA公司生产的色谱纯试剂，硫酸铜、雷纳克氏盐、盐酸羟胺、三氯化铁等为分析纯试剂。 2.3 试液 pH2.4和3.2的磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钾6.8g，加水溶解并稀释至1000mL，用约 500mL的0.05mol/L磷酸溶液调节pH至2.4和3.2。己烷磺酸钠溶液：取己烷磺酸钠0.98g，溶解于1000mL的pH2.4的磷酸盐缓冲液。L—苯丙氨酸溶液：取L—苯丙氨酸1.32g、硫酸铜1g、三乙胺7mL，溶解于1000mL的pH3.2的磷酸盐缓冲液。 方法与结果 1 色谱条件 色谱柱 Dikma ODS3柱（250mm×4.6mm，5µm）；流动相Ⅰ：己烷磺酸钠溶液—甲醇（72.5：27.5）；流动相Ⅱ：L—苯丙氨酸溶液—甲醇（87：13）；柱温：40℃，流速1.0mL·min^-1，检测波长：294nm。在流动相Ⅰ条件下，左旋氧氟沙星及其有关物质达到完全分离，在流动相Ⅱ条件下，左、右旋氧氟沙星达到完全分离，且峰型均稳定，RSD均小于2%（n =10）。见图1（a）、（b），见图2（a）、（b）。 1.光照杂质（6.24min）2.左旋氧氟沙星（7.17min）(左图)光照杂质 (右图)左旋氧氟沙星 （a）左氧氟沙星光照48hHPLC色谱图 （b）左旋氧氟沙星HPLC分离紫外吸收光谱图 图1 左旋氧氟沙星HPLC分离图 1.左氧氟沙星（13.12min）2.右氧氟沙星（15.37min） (左图)左旋氧氟沙星 (右图)右旋氧氟沙星 （a） 氧氟沙星HPLC拆分色谱图 （d）氧氟沙星HPLC拆分紫外吸收光谱图 图2 氧氟沙星HPLC拆分图 2 精密度试验 取一供试注射液按取本品适量，用0.01mol · L^-1盐酸溶液稀释制成含左氧氟沙星120µg · mL^-1，用流动相Ⅰ稀释制成含左氧氟沙星60µg · mL^-1的溶液，摇匀，过滤，即得供试溶液。置自动进样器，自动进样10µL，流动相Ⅰ测定左旋氧氟沙星含量，RSD为1.45%（n=10）。 3 回收率试验 取“3.2”项下制备供试溶液5mL，3份，分别加“3.4”项下制备的对照品溶液适量的3个供试品，置自动进样器，自动进样10µL，流动相Ⅰ测定左旋氧氟沙星，计算加样回收率，结果见表1。 4 标准曲线制备 称取左旋氧氟沙星对照品适量，精密称定，用0.01mol · L^-1盐酸溶液稀释制成含左氧氟沙星1.80mg · mL^-1，用流动相Ⅰ溶解并稀释成浓度为每1ml含左旋氧氟沙星160µg · mL^-1的对照品溶液。精密吸取对照品溶液加甲醇稀释，制成浓度为左旋氧氟沙星5，10，20，40，80，160µg · mL^-1的标准品，置自动进样器，自动进样10µL，流动相Ⅰ进行色谱分析，以峰面积Y对进样浓度C（µg · mL^-1）回归，求的回归方程为：y= 0.766x—1.261，r = 0.9996；线性方程为0.05～1.60µg · mL^-1。 5 供试品制备及测定 分别取样品适量，按“3.2”项制备供试溶液。置自动进样器，自动进样10µL，流动相Ⅰ测定左旋氧氟沙星含量，结果见表2。 6 相关物质检查 6.1 有关物质 分别精取样品适量，用流动相Ⅰ稀释制成含左氧氟沙星2mg · L